眼针对CIRI大鼠抗焦亡作用的机制研究

摘要

目的:通过观察眼针对CIRI大鼠脑组织中IL-1β、IL-18含量和P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1表达水平的影响,探讨眼针通过调控细胞焦亡途径发挥对CIRI大鼠抗炎作用的机制。方法:SD大鼠85只,随机分为假手术组(16只)和造模组(69只),采用改良的线栓法对造模组大鼠进行CIRI模型复制,假手术组大鼠采用相同术式进行手术,但不进行大脑中动脉栓塞。术后以神经功能缺损评分和脑组织TTC染色对CIRI大鼠进行模型质量评价,将造模成功的大鼠再次随机均分为:模型对照组、眼针组、抑制剂组。然后对于眼针组大鼠行眼针干预,干预时机分别为:再灌注即刻及再灌注8、16、24 h,共计进行4次干预。抑制剂组大鼠一次性经腹腔注射格列本脲,500 mg/kg。假手术组和模型对照组大鼠不作处理,正常饲养至实验结束。末次针刺后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,然后采用过量麻醉法处死大鼠,用免疫组织化学法检测、Western blot法检测脑组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平;ELISA法检测脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18的含量。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18含量显著升高,P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平显著上调,差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,眼针组和抑制剂组大鼠脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18含量显著降低,NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CIRI损伤可能引起缺血半暗带脑组织中细胞焦亡的发生,同时脑组织中细胞因子IL-1β、IL-18高表达,P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达高于假手术组;而眼针干预能够抑制IL-1β、IL-18及P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达,进而调控细胞焦亡的发生而发挥抗炎作用。