重组人aFGF的克隆、表达及活性测定

摘要

目的:为了研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的临床应用价值,将其开发为多肽类药物.方法:以RT-PCR从人肺成纤维细胞钓取人aFGF全编码区cDNA,使用Pichia分泌型酵母表达系统表达重组人aFGF,重组蛋白经肝素亲和层析纯化后,以NIH3T3成纤维细胞增殖实验、鸡胚尿囊膜法血管生成实验及小鼠创伤愈合实验检测活性.结果:重组人aFGF蛋白在酵母系统中得到较高量表达(12 mg/L),并能够促进NIH3T3增殖、促进血管增生、促进伤口愈合,而且这种活性能被受体(FGFR)细胞外段拮抗.结论:重组人aFGF在酵母系统中实现高效表达,并具有很好的生物学活性.