酸性成纤维细胞生长因子

摘要： 目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)纳米脂质体(NP)结合超声靶向微泡爆破技术(UTMD)对阿霉素心肌病(DOX-CM)大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制。方法随机将50只健康雄性SD大鼠分为:正常对照组、DOX-CM模型组、MaFGF溶液组、MaFGF-NP组及MaFGF-NP+UTMD组(n=10)。干预6周后,应用超声心动图测定所有大鼠的左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)。实验结束后,取大鼠心肌组织,通过TUNEL荧光染色法观察心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法测定心肌凋亡相关蛋白表达。结果与DOX-CM模型组比较,MaFGF-NP+UTMD组LVIDs及LVIDd明显减小,LVEF、LVFS明显增高,而TUNEL染色结果显示,MaFGF-NP+UTMD组大鼠心肌细胞凋亡明显减少;蛋白免疫印迹法检查结果显示,MaFGF-NP+UTMD组较DOX-CM模型组pAKT/AKT比值和BAX的含量减低,BCL-2的含量升高。结论MaFGF-NP结合UTMD可减轻阿霉素所致心肌损伤,其机制可能与MaFGF减少阿霉素引起的心肌细胞凋亡有关。

摘要： 目的探究重组人酸性成纤维生长因子(RhaFGF)对糖尿病大鼠难愈性皮肤溃疡愈合的影响,并进一步研究RhaFGF对糖尿病大鼠难愈性皮肤溃疡的修复作用及机制。方法建立糖尿病难愈性皮肤溃疡大鼠模型,将28只大鼠随机分为对照组和RhaFGF组,对照组采用生理盐水局部外敷,RhaFGF组采用RhaFGF局部外敷。于第7、14天记录创面面积,并取大鼠皮肤溃疡处新生肉芽组织,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血小板内皮细胞黏附分子(CD31)、细胞核增殖抗原(Ki-67)及病理切片,以对RhaFGF治疗糖尿病难愈性溃疡的治疗效果进行综合评价。结果治疗第7、14天,RhaFGF组的溃疡创面面积小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RhaFGF组的MDA含量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RhaFGF组的SOD活性高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RhaFGF组的CD31阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);RhaFGF组的Ki-67阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。组织病理学检查显示RhaFGF组新生的毛细血管、成纤维细胞数量和胶原蛋白表达量较治疗前增加。结论RhaFGF通过促进糖尿病难愈性溃疡的氧化应激,增加溃疡组织的毛细血管和成纤维细胞生成,提高上皮再生水平,从而表现出对大鼠糖尿病溃疡组织的修复作用。

摘要： 随着糖尿病患病率升高,糖尿病及其并发症越来越受到重视.糖尿病溃疡是糖尿病并发症中的一种,其发病率、致残率、病死率高,患者经济负担重.酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)是目前促进创面愈合较为有效的一种生长因子.本文从糖尿病溃疡难以愈合的发病机制出发,对aFGF的研究现状及其对糖尿病溃疡的治疗作用,在血糖控制、神经损伤、血管损伤等方面的研究进行了阐述.

摘要： 目的 观察复方荆芥熏洗剂对肛周脓肿术后创面愈合及血清生长因子表达的影响.方法 选取86例肛周脓肿手术患者作为研究对象,根据患者及家属意愿分为对照组42例(采用常规治疗)和观察组44例(采用常规治疗联合复方荆芥熏洗剂治疗),均治疗3周.比较2组治疗后临床指标,评估2组治疗前和治疗3、9、15 d时的创面水肿、疼痛情况,比较2组治疗前、治疗3周时的酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平.结果 观察组腐肉完全脱落时间、创面愈合时间短于对照组,创面缩小率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗3、9、15 d时,2组创面水肿评分、视觉模拟评分法(VAS)评分低于治疗前,且观察组评分低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗3周时,2组血清aFGF、bFGF水平高于治疗前,且观察组水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肛周脓肿术后患者使用复方荆芥熏洗剂治疗可促进术后创面恢复,减轻疼痛程度.

摘要： 目的 探讨宫颈癌发生发展中酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达及临床价值.方法 选取2018年1月至12月本院收治的宫颈癌60例[年龄(50.4±2.3)岁]、宫颈上皮内瘤变20例[年龄(50.6±2.7)岁]患者作为研究对象,同时选择正常宫颈组织20例[年龄(50.1±2.1)岁]作为对照对象,均经病理组织学检查确诊.分析各组人群aFGF mRNA与bFGF mRNA基因的表达半定量结果,aFGF、bFGF对Hela细胞增殖的影响.结果 aFGF mRNA与bFGF mRNA基因在宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变中存在过度表达现象,aFGF mRNA与bFGF mRNA在宫颈癌[分别为(1.227±0.048)、(1.324±0.095)]、宫颈上皮内瘤样病变[分别为(0.759±0.092)、(0.799±0.063)]中的基因表达高于对照组[分别为(0.645±0.036)、(0.656±0.114)],两组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).宫颈癌Ⅲ、Ⅳ期aFGF mRNA基因表达分别为(1.300±0.128)、(1.342±0.141),bFGF mRNA基因表达分别为(1.367±0.125)、(1.399±0.130),高于Ⅰ、Ⅱ期[分别为(0.967±0.048)、(1.032±0.077)、(0.999±0.101)、(1.179±0.044)](均P＜0.05).Ⅰ、Ⅱ期aFGF mRNA与bFGF mRNA基因表达高于宫颈上皮内瘤样病变(均P＜0.05).在高分化宫颈癌中aFGF mRNA与bFGF mRNA基因表达为(1.189±0.110)、(1.238±0.095),中分化宫颈癌中分别为(1.139±0.127)、(1.295±0.105),低分化宫颈癌中分别为(1.192±0.096)、(1.319±0.097),差异均无统计学意义(均P＞0.05),故与肿瘤病理类型没有明显关系.分期一样,bFGF mRNA略高于aFGF mRNA,但是整体没有太大差异(P＞0.05);aFGF mRNA的表达和bFGF mRNA的表达呈正相关(P＜0.05);bFGF mRNA略高于aFGF mRNA,但是整体没有太大差异(P＞0.05);aFGF、bFGF水平增高,两组增殖都明显,但是bFGF组增殖更明显,在75.00 μg/L浓度时程度最高.结论 aFGF、bFGF在宫颈癌发生、增殖、浸入期间发挥着重要的作用,可以将其作为重要指标.

摘要： 目的 探讨复方芙蓉花叶提取物对大鼠感染创面愈合的作用及机制.方法 选用60只大鼠根据随机数字表法分为空白组、模型组、庆大霉素组、复方芙蓉花叶组,每组15只.在每组大鼠近尾部脊柱旁制造一创面,除空白组外,其余3组大鼠创面均接种大肠埃希菌及表面葡萄球菌的混合菌,制作感染模型.待造模成功后,空白组和模型组予以凡士林纱条;庆大霉素组予以庆大霉素纱条;复方芙蓉花叶组予以复方芙蓉花叶提取物纱条换药.干预后3、7、15 d观察各组大鼠创面直径;并采用HE染色观察创面组织病理形态变化;利用ELISA法检测创面组织中白介素-1(interleukin-1,IL-1)和酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibrob-last growth factor,aFGF)水平.结果 造模48 h后,各模型大鼠可见白色脓苔、明显红肿、大量渗出和脓液,提示造模成功.与空白组比较,模型组各时间点创面直径均变大(P<0.05);在干预后7、15 d,与空白组、模型组、庆大霉素组比较,复方芙蓉花叶组创面直径明显变小(P<0.05).HE染色结果示,干预后各时间点,模型组见较多中性粒细胞及淋巴细胞,复方芙蓉花叶组较其他3组炎症细胞减少、肉芽组织增生、肌母细胞增多.ELISA检测结果示,与空白组比较,模型组干预后3、7 d的IL-1含量增多(P<0.05);干预后3、7 d,与模型组比较,复方芙蓉花叶组IL-1含量明显减少(P<0.05);干预后3、7、15 d,与庆大霉素组比较,复方芙蓉花叶组IL-1含量减少(P<0.05).与空白组比较,模型组干预后15 d的aFGF含量降低(P<0.05);干预后3、7、15 d,与模型组、庆大霉素组比较,复方芙蓉花叶组aFGF含量明显增多(P<0.05).结论 复方芙蓉花叶提取液可能通过控制感染创面组织中IL-1的水平以及上调创面组织中aFGF的表达,从而控制创面炎症反应、使炎症细胞和水肿减轻、促进肉芽组织增生、加快创面愈合时间.

摘要： 目的 探讨A型肉毒毒素(BTXA)对增生性瘢痕组织成纤维细胞的作用以及酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响.方法 实验用的成纤维细胞来源于增生性瘢痕组织,在体外用含有0.2～1.6 U/ml浓度的BTXA的培养液孵育增生性瘢痕的成纤维细胞,采用MTT法测定细胞的存活率,罗丹明123染色在荧光显微镜下观察线粒体膜电位改变,H2DCFDA 检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,评估其对瘢痕成纤维细胞的凋亡影响.利用RT-PCR分析用药前后aFGF和bFGF mRNA表达的变化.结果 BTXA能够降低增生性瘢痕成纤维细胞的线粒体膜电位,改变线粒体膜通透性的稳定状态,并能够增加细胞内的活性氧(ROS)含量从而抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,同时诱导过度增殖的成纤维细胞凋亡;同时A型肉毒毒素也能够使两种成纤维细胞生长因子aFGF和bFGFmRNA的表达也呈下降趋势.结论 BTXA对增生性瘢痕组织中成纤维细胞的增殖有明显抑制并诱导其凋亡,其作用机制可能与BTXA下调瘢痕组织中的成纤维细胞aFGF和bFGF两种因子的mRNA的表达有关.

摘要： Objective To develop new anti-acne drugs, a fusion protein of human defensin-2 and acidic fibroblast factor-1 with bactericidal activity and healing promotion was constructed. Methods The hBD-2 gene and haFGF-1 gene were amplified by using human hepatocyte HepG2 cDNA as template. HBD2-haFGF1 fusion gene was constructed by SOE-PCR. The hBD2-haFGF1/pET21 b prokaryotic expression vector was construed and expressed in E. coli BL (21). Bioinformatic methods were used to predict and analyze the physicochemical properties of the fusion protein. Results The 123 bp hBD-2 gene and 420 bp haFGF-1 gene were obtained by RT-PCR. The prokaryotic expression vector hBD2-haFGF1/pET21 b was successfully constructed. After induced by IPTG, the fusion protein of hBD2-haFGF1 was effectively expressed in E.coli BL (21) with a relative molecular weight of 23 800. Bioinformatics showed that hBD2-haFGF1 protein was suitable for expression in E. coli and it was an unstable hydrophilic protein with good thermal stability. HBD2-haFGF1 fusion protein was mainly composed of extended strand, β-turn and random coil, in which the beta defensin conserved domain and the FGF superfamily conserved domain were retained. Conclusion The fusion gene of hBD2-haFGF1 has been constructed and the fusion protein of hBD2-haFGF1 may be induced and expressed in vitro. The physical and chemical properties of the fusion protein are predicted and analyzed by bioinformatics analysis. The above studies lay a foundation for further purification and activity analysis.%目的为开发新型抗痤疮药物,构建具有杀菌和促进愈合的人防御素2和酸性成纤维因子1融合蛋白.方法 以人肝癌细胞HepG2 cDNA为模板,分别扩增hBD-2基因和haFGF-1基因.采用SOE-PCR方法构建hBD2-haFGF1融合基因.构建hBD2-haFGF1/pET21b原核表达载体,并转化入E.coli BL(21)进行诱导表达.通过生物信息学方法对融合蛋白的理化性质进行预测和分析.结果 RT-PCR分别获得123 bp的hBD-2基因和420 bp的haFGF-1基因,SOE-PCR获得了588 bp的hBD2-haFGF1融合基因,成功构建原核表达载体hBD2-haFGF1/pET21b,经过IPTG诱导,hBD2-haFGF1融合蛋白可在E.coli BL(21)中有效表达,相对分子量为23 800.生物信息学显示hBD2-haFGF1蛋白适合在大肠杆菌中表达,是一个不稳定的亲水性蛋白,具有较好的热稳定性.hBD2-haFGF1融合蛋白主要由延伸链、β转角和随机卷曲组成,结构中保留了β防御素保守结构域和FGF超家族保守结构域.结论 构建了hBD2-haFGF1融合基因,并在体外诱导表达了hBD2-haFGF1融合蛋白,通过生物信息学分析对融合蛋白的理化性质进行了预测和分析,上述研究为进一步的纯化和活性分析奠定了研究基础.

摘要： 本发明涉及一种生物工程系统，特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段，该插入片段包括，例如，按顺序，表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。

摘要： 本发明提供了用于治疗的多肽变体，特别是用于联合治疗角膜上皮缺损(PCED)和/或角膜血管新生的成纤维细胞生长因子(FGF)变体和肝细胞生长因子(HGF)变体。

摘要： 本发明涉及多种新鉴定的多核苷酸,由这类多核苷酸编码的多肽,这类多核苷酸和多肽的用途,以及这类多核苷酸和多肽的生产。更具体地,本发明的多肽是角质形成细胞生长因子,下文中有时也称之为“KGF－2”,以前也称之为成纤维细胞生长因子12(FGF－12)。本发明也涉及抑制这类多肽的作用。本发明另外还涉及KGF－2促进或加快创伤愈合的治疗用途。本发明也涉及KGF－2的新的突变体形式,所述突变体形式显示出活性增强,稳定性增加,产量较高或溶解性较好。

摘要： 本发明涉及一种生物工程系统，特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段，该插入片段包括，例如，按顺序，表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。

摘要： 本发明公开了一种载有噬菌体和酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的水凝胶伤口敷料的制备方法及其应用，该伤口敷料由水凝胶包裹噬菌体而形成。该伤口敷料具有以下特征：本发明中应用的噬菌体来源广泛，扩增简单，制备成本低；特异性强，在杀死致病菌的同时，不会影响有益菌群；安全性好，目前没有对动物细胞产生影响的报道；本发明中的水凝胶，以天然高分子为原料，安全无毒，有良好的吸水性和机械性能。通过一系列实验评价，此种伤口敷料可以有效杀死伤口组织中的细菌，并明显促进伤口愈合。这为对抗伤口耐药菌感染提供了一种新的思路。

摘要： 本发明的目的是提供一种重组人酸性成纤维细胞生长因子大规模制备方法，所述方法优化了大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1在30L中试规模下高密度细胞发酵相关参数以及优化了rhFGF‑1的纯化工艺，实现了rhFGF‑1稳定的大规模化生产。具体地，所述方法通过优化大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1工程菌株，及利用曲面响应分析方法优化得到的发酵工艺，柱层析串联纯化工艺，可以获得大量高纯度的重组人酸性成纤维细胞生长因子蛋白，适宜大规模生产。

摘要： 本发明提供了一种重组人酸性成纤维细胞生长因子凝胶剂及其制备方法。该制备方法包括如下步骤：将凝胶基质溶于注射用水，充分溶胀形成A液；然后对A液进行灭菌，备用；取注射用水，加入保湿剂、防腐剂和凝胶基质pH调节剂，混合均匀制成B液；取注射用水，加入凝胶体系pH调节剂、rhAFGF原液和保护剂混合均匀形成C液；将上述B液和C液过滤除菌，然后将B液加入至灭菌后的A液中，搅拌混合均匀，再加入C液搅拌混合均匀即得rhAFGF凝胶。本发明提供的凝胶剂具有缓释持久的特点，且稳定性高，患者涂抹于皮肤上形成凝胶，凝胶基质使活性成分缓慢释放，其药物作用更加持久，同时使用也较为方便。

摘要： 本发明涉及一种稳定的酸性成纤维细胞生长因子制剂及其制备方法和应用。该制剂包括酸性成纤维细胞生长因子、磷酸盐缓冲液和稳定剂；其中，该酸性成纤维细胞生长因子的浓度为1000‑100000U/ml；该磷酸盐缓冲液的摩尔浓度为10‑50mmmol/L；该稳定剂的质量体积百分比含量为0.01‑30％(w/v)；该液态制剂的pH值为6.0‑8.0。本发明提供的酸性成纤维细胞生长因子制剂中蛋白的稳定性好，以液态保存或者冻干后保存，均具有高度的稳定性及生物学活性；此外，该制剂的制备方法简单，成本低廉，可在创伤皮肤的愈合和医学美容等领域中大规模推广。

摘要： 本发明公开了一种载有噬菌体和酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的水凝胶伤口敷料的制备方法及其应用，该伤口敷料由水凝胶包裹噬菌体而形成。该伤口敷料具有以下特征：本发明中应用的噬菌体来源广泛，扩增简单，制备成本低；特异性强，在杀死致病菌的同时，不会影响有益菌群；安全性好，目前没有对动物细胞产生影响的报道；本发明中的水凝胶，以天然高分子为原料，安全无毒，有良好的吸水性和机械性能。通过一系列实验评价，此种伤口敷料可以有效杀死伤口组织中的细菌，并明显促进伤口愈合。这为对抗伤口耐药菌感染提供了一种新的思路。

摘要： 本发明的目的是提供一种重组人酸性成纤维细胞生长因子大规模制备方法，所述方法优化了大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1在30L中试规模下高密度细胞发酵相关参数以及优化了rhFGF‑1的纯化工艺，实现了rhFGF‑1稳定的大规模化生产。具体地，所述方法通过优化大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1工程菌株，及利用曲面响应分析方法优化得到的发酵工艺，柱层析串联纯化工艺，可以获得大量高纯度的重组人酸性成纤维细胞生长因子蛋白，适宜大规模生产。