从半合成噬菌体抗体库筛选基质金属蛋白酶-2人抗体

摘要

目的:从半合成噬菌抗体库中筛选抗金属蛋白酶-2(MMP-2)人源抗体.方法:将重组人MMP-2固相化,通过多轮"吸附-洗脱-扩增”从半合成抗体库筛选特异性抗体,用ELISA方法对所获克隆进行特异性分析及MMP-2中和活性.结果:经过4轮筛选,得到多个可与MMP-2结合的克隆,但这些克隆也可与其它无关抗原结合,选1个克隆AD20进行竞争抑制性ELISA分析,发现其与MMP-2的结合可被游离MMP-2特异性抑制,不被无关抗原抑制,而与无关抗原的结合不能被所测的任何游离抗原所抑制,进一步检测AD20可中和MMP-2的酶解活性,DNA序列测定证明其为人抗体.结论:从半合成抗体库中获得一株具有中和活性的抗MMP-2人抗体,该抗体对无关抗原显示的非特异性结合是由不同模式介导,属于多反应性.