从半合成噬菌体抗体库中筛选抗角蛋白人抗体

摘要

目的:从半合成噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白抗体并进行鉴定.方法:以表皮角蛋白为抗原,通过吸附-洗脱-扩增过程从半合成噬菌体抗体库中筛选特异性抗角蛋白抗体,对其抗原结合活性和序列进行分析鉴定.结果:经过4轮筛选,获得20个能与角蛋白结合的阳性克隆,其中可产生特异性抗角蛋白抗体的克隆18个.经DNA指纹分析,判断所获克隆分别包含4个不同的Fab段基因.经切除基因Ⅲ后1个克隆表达出可与角蛋白特异性结合的可溶性Fab,序列分析表明其Vκ和VH分别属于Vκ1亚群和VH1亚群,VH CDR3序列符合半合成抗体库构建时的引物设计.结论:利用噬菌体抗体库技术可以不经免疫制备出高特异性的人源性抗角蛋白抗体.