人SCF和IL-15基因共转染NK细胞系生物学特性研究

摘要

目的:研究人SCF和人IL-15基因共转染NK细胞系的生物学特性.方法:利用LipofectAMINETM将IL-15真核表达载体pcDNA3-hIL-15和SCF真核表达载体pcDNA3-hSCF共转染NK-92细胞,RT-PCR鉴定表达SCF和IL-15的细胞克隆并以SCF依赖细胞株TF-1和IL-15依赖细胞株CTLL-2测定上清活性,MTT法检测增殖和杀伤活性.流式细胞术检测细胞表面分子CD3、CD16、CD56、CD25、CD48、CD54、CD69和CD95.结果:建立共表达hSCF和hIL-15基因的NK-92S15细胞株,在IL-2培养条件下,其增殖能力表现出更强的聚集趋势,且生长要求有一定的细胞浓度,杀伤活性有不同程度下降.细胞表面分子CD16和CD56没有显著变化,而NK细胞活化相关分子CD25、CD48、CD54和CD95明显降低.结论:可以通过SCF和IL-15基因共修饰NK-92,改变其生物学特性,观察NK细胞活化、杀伤相关分子的特征,使NK细胞系有更深入的研究价值.