用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定

摘要

目的:制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列-白细胞介素18(EGF-IL-18)融合蛋白,并鉴定其生物学活性.方法:利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性.结果:经SDS-PAGE和Western blot检测,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性.IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性.结论:成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白--EGF-IL-18融合蛋白,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性,可用于肿瘤的生物治疗研究.