C-肽化学发光免疫分析方法学研究

摘要

目的:建立人血清C-肽化学发光免疫分析法.方法:采用两株高特异的抗C-肽单克隆抗体,以一株包被微孔板制成固相抗体,另一株标记碱性磷酸酶,以金刚烷衍生物为底物,双抗体夹心法测定人血清C-肽浓度.结果:以5 μg/ml单克隆抗体包被微孔板,酶结合物以1: 5 000稀释,在C-肽浓度0.1～15 ng/ml范围内线性良好,线性方程为y=0.957 5x-0.086 9, 相关系数0.99;灵敏度为0.01 ng/ml,批内、批间变异系数分别为5.8%、8.4%;平均回收率98.4%, 范围91.5%～105.0%.结论:文中建立的人血清C-肽化学发光免疫分析法,首次建立小分子人血清C-肽双抗体夹心化学发光免疫法测定.线性好,灵敏度较常规高出一个数量级,准确度和精密性高,能够满足一般临床诊断和科研的应用.