人gACE多肽抗原的设计及多克隆抗体的制备和鉴定

摘要

目的:制备抗人gAGE的多克隆抗体,为人gACE的功能研究提供实验室基础.方法:根据生物信息学软件分析人gAGE蛋白的二级结构、亲水性、疏水性和抗原性等理化性质,经同源性检索,综合考虑抗体设计的其他因素,设计一段由18个氨基酸组成的多肽.将合成后的多肽与KLH偶联,免疫家兔制备多克隆抗体.利用ELISA、Western blot、免疫组织化学等方法来测定其效价和特异性.结果:成功分析预测其抗原性;制备了抗人gACE的多克隆抗体;利用ELISA,Western blot和免疫组织化学染色的方法证实此抗体效价较高,特异性强.结论:利用生物信息学软件较好地预测出人gACE的抗原性,并成功制备了较高特异性的人gACE多克隆抗体.