登革2型病毒体外诱导Ana-1巨噬细胞极化及其TLR7表达的研究

摘要

目的:研究登革2型病毒体外诱导Ana-1细胞极化及TLR7表达情况,分析其在登革病毒致病过程中的可能作用.方法:用DEN2感染Ana-1细胞,24、72、120小时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测病毒核酸、iNOS、Arg-1、IL-10、IL-12p40 mRNA;Western blot检测iNOS、Arg-1、TLR7蛋白;双抗体夹心ELISA法检测TNF-α水平.结果:巨噬细胞被DEN2感染后病毒核酸在72小时达峰值,2-ΔΔCt值为159.98±37.80;iNOS mRNA及蛋白表达明显上升(P＜0.05),IL-12p40 mRNA、TNF-α水平显著升高(P＜0.05),72小时达峰值;IL-12p40 mRNA 2-ΔΔCt值为11.1±2.41,TNF-α浓度为(454.72±13.41)pg/ml.Arg-1 mRNA及蛋白较M2型极化对照组降低(P＜0.05);IL-10 mRNA与正常对照组无显著差异(P＜0.05);TLR7表达低于同期正常对照组.结论:Ana-1细胞被DEN2感染后向M1型极化;DEN2可下调Ana-1细胞TLR7表达,可能是DEN2发生免疫逃逸的机制之一;Ana-1细胞 TNF-α水平与细胞内DEN2核酸呈正相关.