烟草烟雾通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN发生上皮间质转化

摘要

目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制.方法:以不同浓度(0.25％,0.5％及1％)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1受体抑制子(SB431542)预处理后,加入1％ CSE共培养.实时定量PCR (RT-PCR)检测E-cadherin和Vimentin RNA表达;印迹法(Western blot)检测TGF-β1、Smad2、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达量.结果:经不同浓度的CSE作用,E-cadherin无论是在RNA还是在蛋白水平表达均下调,而Vimentin表达均上调;同时,TGF-β1、p-Smad2和N-cadherin蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制子(SB43542)干预后,p-Smad2表达量明显降低(P＜0.05),E-cadherin蛋白表达量较对照组明显增加(P＜0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量较对照组明显降低(P＜0.05).结论:CSE可能通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,从而诱导RLE-6TN发生EMT.