固相萃取-反相高效液相色谱法测定全血环孢素A

摘要

目的：采用快速固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素Ａ。方法：全血用水溶血，用乙腈和水混合液沉淀蛋白后，用ＳＰＥ固相萃取柱萃取，５０％甲醇冲洗杂质，９５％甲醇洗脱，挥干，乙腈重组，正己烷进一步除去杂质，重组液上机。本法采用柱温为７０℃的Ｃ１８反相色谱柱，以乙腈∶甲醇∶水（３∶１∶１，Ｖ∶Ｖ）为流动相，检测波长２１０ｎｍ。结果：本法最低检出浓度为２０ｎｇ·ｍｌ－１。至少在４０～１５００ｎｇ·ｍｌ－１范围内呈线性。平均方法回收率１０２．９％，ＲＳＤ均在１０％以内。结论：本法灵敏，特异，既适合临床常规检测又适合ＣｓＡ的药动学研究。