高效液相色谱法测定人血清中普卢利沙星活性代谢物浓度

摘要

目的:建立HPLC快速测定人血清中普卢利沙星活性代谢物（NM394）浓度。方法:以氟罗沙星为内标,样品经酸化沉淀蛋白后,上清液先后分别以3mL正己烷和2mL醋酸乙酯进行反洗后进样。分析柱Diamonsil Platisil C18（150mm×4.6mm,5μm）,保护柱Dikma EasyGuard C18（8mm×4mm,5μm）,柱温35℃;流动相为乙腈-0.02mol.L-1磷酸二氢钾（pH2.7,含0.5%三乙胺）（10∶40.5）,流速1mL.min-1,检测波长275nm。结果:NM394在10~5 000μg.L-1范围内线性关系良好（r2=0.999 7）,最低定量限为10μg.L-1。日内、日间精密度均小于6%,方法学回收率为96.31%~102.49%。结论:本方法快速、准确、灵敏、选择性高,适用于普卢利沙星人体药动学研究。