高效液相色谱荧光法测定人血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394的浓度

摘要

目的:建立普卢利沙星活性代谢产物NM394血药浓度的高效液相色谱分析方法.方法:以妥舒沙星为内标,血浆样品用固相萃取,色谱柱:Waters Symmertry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),在线过滤器;以0.1%三乙胺水溶液(用10%磷酸调pH为2.8)-乙腈(80:20)为流动相;激发波长为280 nm,发射波长为425 nm;流速1.0 mL·min-1,柱温为25℃.结果:NM394在0.025～4.800μg·mL-1的范围内有良好的线性关系(r=0.9999)最低检测浓度为0.025μg·mL-1,该方法的相对回收率为96.7%～104.7%(n=5);绝对回收率为76.1%～96.5%(n=5);日内RSD为0.8%～2.6%,日间RSD为1.4%～3.3%.结论:本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,可用于血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394的测定及人体内药代动力学研究.