高效液相色谱—串联质谱法测定人腹腔积液中伏立康唑浓度及临床应用

摘要

目的:建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人腹腔积液中伏立康唑浓度，并应用于临床样本检测。方法:腹腔积液样品经纯乙腈沉淀蛋白后，通过Hypersil GOLD C18色谱柱分离；流动相为0.1%甲酸水-纯乙腈（60∶40,V/V）;流速0.4 mL·min-1;柱温30℃。质谱采用电喷雾电离、正离子多反应监测模式扫描定量：m/z 350.0→281.0（伏立康唑）和m/z 353.1→284.1（伏立康唑-d3,内标）。结果:腹腔积液样品中伏立康唑浓度在0.05～10.00μg·mL-1范围内线性良好（R~2=0.999 9）。日内和日间精密度均小于2%,提取回收率为（100.35±4.37）%～（107.68±3.97）%,内标归一化基质效应因子为（98.36±1.69）%～（100.57±1.10）%且RSD小于2%。此外，各项稳定性考察结果均合格。利用该方法测得4例重度肝硬化患者静脉用伏立康唑首剂给药（约滴注1 h）的腹腔积液0～12 h的浓度-时间曲线下面积(AUC0-12)和血浆AUC0-12的比值平均为0.54（范围0.49～0.61）,提示肝硬化患者中伏立康唑具有较好的腹膜腔渗透性。结论:该方法简单、快速、灵敏、准确，适用于人腹腔积液中伏立康唑的检测和临床药动学研究。