温阳化浊通络方调控DNA甲基转移酶对硬皮病患者Treg细胞增殖的影响

摘要

目的:研究温阳化浊通络方（WYHZTLF）对DNA甲基转移酶（DNA methyltransferases, DNMTs）及叉头翼状螺旋转录因子3（forkhead box protein 3,FOXP3）表达的影响，探讨其调控硬皮病患者调节性T细胞（regulatory T cell, Treg）细胞增殖的作用机制。方法:用Wistar雌性大鼠制备温阳化浊通络方含药血清。收集硬皮病患者外周血，分选Treg细胞，用含药血清处理后，通过CCK-8法检测含药血清对Treg细胞增殖的影响，免疫荧光法检测FOXP3蛋白表达，qRT-PCR法和Western blot法检测DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA及蛋白表达。结果:与空白血清组相比，低、中、高剂量含药血清组均可促进Treg细胞的增殖，中、高剂量组促进作用更加显著（P＜0.05,P＜0.01）;低、中、高剂量含药血清组均可促进FOXP3蛋白表达（P＜0.01）;中、高剂量含药血清组明显抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA表达（P＜0.05）;高剂量含药血清组显著抑制DNMT1蛋白表达水平（P＜0.05）,低、中、高剂量组显著抑制DNMT3A和DNMT3B蛋白表达（P＜0.01,P＜0.01）。结论:温阳化浊通络方促进硬皮病患者Treg细胞增殖可能与抑制DNMT1、DNMT3A和DNMT3B表达从而促进FOXP3表达有关。