反义真核细胞转化生长因子βI型受体与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1联合作用对大鼠肝纤维化的影响

摘要

目的 观察反义转化生长因子β I型受体(T β R I)真核表达质粒与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)真核表达质粒联合作用对实验性大鼠肝纤维化的影响.方法 构建大鼠反义真核细胞表达质粒,导人大鼠肝纤维化模型体内,通过I型胶原的免疫组织化学以及苦味酸-酸性品红染色观察两种反义质粒联合作用对大鼠肝纤维化的影响,用目标积分吸光度(A)值表示各实验组动物肝组织中蛋白的表达量.结果 反义TβRI治疗组、反义TβRI+反义TIMP-1治疗组、反义TIMP-1治疗组、pcDNA3.1(+)空质粒对照组、模型对照组、正常对照组T β R I蛋白的A值分别为:(2.11±0.88)×105、(1.06±0.57)×105、(3.46±1.14)×105、(5.66±2.54)×105、(5.19±1.22)×105和(0.38±0.27)×105;TIMP-1蛋白的A值分别为:(1.10±0.22)×105、(0.30±0.12)×105、(0.65±0.15)×105、(2.05±0.36)×105、(1.97±0.28)×105和(0.10±0.12)×105;I型胶原的蛋白表达的A值分别为:(4.37±1.30)×105、(0.90±0.32)×105、(3.40±0.91)×105、(6.90±1.61)×105、(7.34±1.68)×105和(0.41±0.21)×105.反义TIMP-1治疗组TIMP-1蛋白表达量显著降低(P＜0.05),反义T β RI治疗组T βRI蛋白表达量显著降低(P＜0.05),两种反义质粒可有效抑制相应蛋白的表达,反义TIMP-1表达质粒与反义TβR I表达质粒均可减少受损肝脏中I型胶原的沉积(P＜0.05),联合应用可进一步减少受损肝脏中I型胶原的沉积(P＜0.01).在病理形态学方面的观察,反义TIMP-1表达质粒与反义T β R I表达质粒均可使受损肝脏的病理形态有一定改善,联合应用可使受损肝脏的病理形态得到进一步的改善. 结论反义TIMP-1表达质粒与反义T βR I表达质粒对肝纤维化的发展均有一定的干预作用,联合作用可产生更有效的阻止作用.