目的探讨 IL-2和 IL-15激活的供者自然杀伤（NK）细胞在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）中减轻移植物抗宿主病（GVHD）发挥移植物抗白血病效应方面的作用。方法采用免疫磁珠分选小鼠脾 NK 细胞,采用添加 IL-2和 IL-15的培养基扩增 NK 细胞并测定 NK 细胞杀伤活力。C57BL/6小鼠作为供鼠,BALB/c 小鼠作为受鼠,部分小鼠移植前8天静脉接种 EL9611白血病细胞。异基因移植小鼠输注骨髓细胞5×10~6和睥细胞5×10~6。NK 细胞治疗组输注骨髓细胞和脾细胞各5×10~6以及激活的 NK 细胞1×10~7,并且给予腹腔注射 IL-2和 IL-15。移植后观察 GVHD 发生、生存期、嵌合度、免疫重建。结果分选 NK 细胞纯度为95.7%～97.1%。培养后 NK 细胞杀伤活力较静息时增加3倍。单纯异基因骨髓细胞输注组小鼠末见 GVHD 发生,异基因骨髓及脾细胞移植对照组移植后1周起开始出现 GVHD 表现。实验组小鼠发生 GVHD 的严重程度明显低于脾细胞输注小鼠（P＜0.05）。单纯全身照射预处理小鼠生存期9.5～14.0 d。白血病模型中对照组移植后100d 生存率10%,其余死于白血病;实验组80%生存期超过100 d,实验组生存期明显长于对照组（P＜0.01）。实验组小鼠移植后2周外周血 NK 细胞占4.8%,对照组外周血 NK 细胞占2.8%,实验组 NK 细胞恢复早于对照组（P＜0.05）。实验组 TRBV 基因重建比对照组快,而且 TRBV 家族基因表达数比对照组多,对照组小鼠多见单克隆及寡克隆表达。结论 IL-2和 IL-15在体外可以有效促进 NK 细胞增殖与激活。allo-HSCT 时给予激活的供者 NK 细胞输注以及相关细胞因子处理可以促进免疫重建、减轻GVHD 发生、降低白血病复发。
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