吡斯的明对人心肌成纤维细胞增殖、Ⅰ型胶原纤维表达及增殖信号通路的影响

摘要

目的 探讨吡斯的明(PYR)对人心肌成纤维细胞(HCF)增殖、Ⅰ型胶原纤维(COL1)表达及增殖信号通路的影响.方法 采用转化生长因子β(TGFβ)刺激HCF.根据HCF的干预情况分为四组:对照组、PYR组、TGFβ组(TGFβ10 ng/ml)及TGFβ+PYR组.采用流式细胞仪分析细胞周期分布;羟脯氨酸法检测COL1含量;反转录酶-聚合酶链锁反应法(RT-PCR)测定结缔组织生长因子(CTGF)和Smad3的mRNA表达量;免疫印迹法测定CTGF、Smad3及pSmad3的蛋白表达量.结果 与对照组相比,TGFβ组的S/G2期细胞比例、COL1合成量、CTGF的mRNA和蛋白表达量、Smad3的mRNA和蛋白表达量及pSmad3蛋白表达量均增高(P均<0.05).采用TGFβ10 ng/ml与不同浓度PYR处理HCF后发现PYR 100μmol/L可使S/G2期细胞比例最低.与TGFβ组相比,TGFβ+PYR组(TGFβ10 ng/ml+PYR 100μmol/L)的S/G2期细胞比例(30.8％±1.4％比48.6％±3.5％)、COL1合成量(0.95±0.15比1.25±0.18)、CTGF mRNA(1.73±0.10比2.92±0.12)及CTGF蛋白表达量(1.23±0.42比2.36±0.62)均下降(P均<0.05).两组的Smad3 mRNA及Smad3、pSmad3蛋白表达量差异无统计学意义(P均>0.05).结论 PYR可减轻TGFβ诱导的HCF增殖和COL1表达,其机制可能与抑制CTGF的表达有关.