过表达LncRNA LINC00261通过靶向miR-362-5p调控前列腺癌细胞增殖、凋亡的机制

摘要

目的 探讨长链非编码RNA LINC00261(LncRNA LINC00261)调控微小RNA-362-5p(miR-362-5p)表达影响前列腺癌细胞增殖及凋亡的机制.方法 实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测LINC00261和miR-362-5p在前列腺癌细胞系中的表达情况.双荧光素酶报告基因检测LINC00261与miR-362-5p的相互作用.噻唑蓝(MTT)法检测LINC00261过表达与抑制miR-362-5p表达后前列腺癌细胞增殖能力的变化.细胞凋亡实验检测LINC00261过表达与抑制miR-362-5p表达后前列腺癌细胞凋亡行为的变化.Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、B淋巴细胞瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3蛋白表达.结果 前列腺癌细胞中LINC00261的表达水平明显低于正常前列腺上皮细胞(P<0.05),而miR-362-5p的表达水平明显高于正常前列腺上皮细胞(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实LINC00261可靶向结合miR-362-5p,并可负向调控miR-362-5p表达;LINC00261过表达或抑制miR-362-5p表达后前列腺癌细胞增殖活性明显低于阴性对照组(P<0.05),细胞凋亡率明显增高(P<0.05),促进p21、p27、Bax、酶切caspase-3表达(P<0.05),而明显抑制CyclinD1、Bcl-2表达(P<0.05);miR-362-5p过表达可逆转LINC00261过表达对前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的作用.结论 LINC00261过表达可通过下调miR-362-5p表达进而调控前列腺癌细胞增殖及凋亡过程.