RNA干扰沉默Survivin重组腺病毒质粒的构建

摘要

目的：利用RNA干扰技术构建Survivin重组腺病毒质粒，并进行鉴定，为进一步结直肠癌的体内外试验做准备。方法参考shRNA的设计策略，选择Survivin 基因（基因序号为NM_001168.2），利用Primer Premier5.0设计上下游引物，利用NCBI 中的Blast检测序列的特异性，按载体构建的试剂盒进行。将重组质粒与人胚肾293 T细胞混合培养，收集并处理，提纯病毒。构建成功后利用酶切法进行鉴定。结果经PCR法、酶切鉴定后证实Survivin重组腺病毒质粒成功构建。结论利用RNA干扰技术成功构建了Survivin重组腺病毒质粒。