ART1基因的表达对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及可能作用机制

摘要

目的：探讨ART1基因的表达对小鼠结肠癌CT26细胞转移潜能的影响及可能作用机制。方法将ART1－shRNA转入到小鼠结肠癌CT26细胞，置于荧光显微镜下观察该病毒的转染效率；采用RT－PCR和Western印迹法鉴定ART1基因沉默的效果；采用侵袭实验及黏附实验观察CT26细胞受ART1基因沉默的影响，并采用明胶酶谱法测定对该细胞中基质金属蛋白酶（ MMP）－2、MMP－9蛋白活性的影响。结果病毒感染4 d后ART1 mRNA 的表达量在ART1－shRNA 组中明显低于阴性对照组和空白对照组（P＜0．01）。 ART1－shRNA组CT26细胞的ART1蛋白的表达量明显低于阴性对照组和空白对照组（P＜0．01）。 ART1－shRNA组CT26细胞数明显少于阴性对照组和空白对照组（P＜0．05）；ART1－shRNA组的侵袭抑制率与阴性对照组和空白对照组相比，差异有统计学意义（P＜0．05）。与阴性对照组和空白对照组相比，RT1－shRNA 组CT26细胞与纤维连接蛋白的黏附能力均明显降低（P＜0．01）。 RT1－shRNA 组CT26细胞中RhoA／Rho相关螺旋卷曲形成蛋白激酶（ROCK1）、RhoA、MMP－2、MMP－9蛋白表达明显低于阴性对照组和空白对照组（ P＜0．01）。结论 ART1基因沉默能够导致小鼠结肠癌 CT26细胞的侵袭和黏附力降低，可能与 ART1基因沉默后ROCK1、RhoA、MMP－2、MMP－9的表达水平下调有关。说明ART1基因在结肠癌的侵袭和转移中具有重要作用。