组织因子途径抑制物－2在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的：观察组织因子途径抑制物（TFPI）－2在正常宫颈、宫颈上皮内肿瘤（CIN）和宫颈鳞癌组织中表达的差异及 TFPI－2对体外培养的宫颈癌 Hela 细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2009～2010年在该院妇产科住院治疗的68例宫颈鳞癌患者，48例 CIN 患者及12例宫颈正常患者的宫颈组织标本，免疫组化染色检测宫颈组织中 TFPI－2的表达。取生长状态良好的宫颈癌 Hela 细胞，应用基因转染的方法建立 TFPI－2高表达细胞系，Real－time PCR 和 Western 印迹方法检测基因转染前后细胞中 TFPI－2 mRNA 和蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测各组细胞的增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果①免疫组化染色显示，正常宫颈组织、CIN 和宫颈癌中 TFPI－2表达逐渐降低，三者间比较差异有统计学意义（P＜0．01）。②体外观察发现，转染 pcDNA3．1－TFPI－2的 Hela－TFPI－2组细胞 TFPI－2 mRNA 和蛋白表达明显高于转染空白质粒组和空白对照组（P＜0．01）；MTT 结果显示，Hela－TFPI－2组细胞增殖速度明显低于空白对照组和空白质粒组，且随着培养时间的延长，这种抑制作用更明显（P＜0．05）；流式细胞仪检测结果显示 Hela－TFPI－2组细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白质粒组（ P＜0．05）。结论 TFPI－2表达随着宫颈病变的进展逐渐降低；同时过表达的 TFPI－2可明显抑制宫颈癌 Hela 细胞增殖，促进其凋亡。提示 TFPI－2的表达减少可能是宫颈癌发生发展的机制之一，TFPI－2可能是治疗宫颈癌的新靶点。