低浓度补肾中药血清联合骨形态发生蛋白-2对人脐血间充质干细胞的生物学作用

摘要

目的：观察低浓度补肾中药血清联合骨形态发生蛋白（ BMP）-2对人脐血间充质干细胞（ MSCs）体外增殖、成骨分化的生物学作用。方法取正常孕妇脐静脉血培养第3代人脐血 MSCs，制备补肾中药大鼠血清，按诱导分化培养基不同，随机分为空白对照组、中药血清组、BMP-2组、中药血清＋BMP-2组（联合组）。以MTT比色法检测脐血MSCs增殖活性，观察碱性磷酸酶（ ALP）活性、矿化结节及Ⅰ型胶原染色以检测细胞成骨分化能力。结果与空白对照组比较，联合组、BMP-2组在诱导第3、5天细胞增殖活性明显提高，在诱导第3、6、9、12天 ALP 活性明显提高（ P＜0.05）。与BMP-2组比较，中药血清＋BMP-2组在诱导第5天增殖活性明显提高，在诱导第6天ALP活性明显提高（P＜0.05）。成骨诱导第14天，除空白对照组外各组von Kossa染色均可见细胞间散在黑色颗粒，尤以联合组为明显；而Ⅰ型胶原纤维表达，BMP-2组、联合组与空白对照组相比均明显增强。结论低浓度补肾中药血清联合BMP-2后能诱导人脐血MSCs增殖及定向成骨分化，是复合型诱导因子的一种理想选择。