不同浓度补肾中药血清对人脐血间充质干细胞成骨活性的影响

摘要

目的 观察不同浓度补肾中药血清对人脐血间充质干细胞体外成骨活性的影响,探讨中药血清浓度与成骨分化能力的相关性.方法 制备低、中、高浓度补肾中药大鼠血清,培养第3代人脐血间充质干细胞,按诱导分化培养基中加入中药血清浓度的不同及是否联合骨形态蛋白(BMP-2),分为基本培养基组(对照组)、5％中药血清组、10％中药血清组、15％中药血清组、5％中药血清+BMP-2组、10％中药血清+BMP-2组、15％中药血清+BMP-2组及BMP-2组,分别观察各组碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(BGP)含量及钙离子浓度变化.结果 低、高、中不同浓度中药血清组分别在诱导第6、9天及第3、6天可提高ALP活性,10％中药血清组在诱导第9、12天能提高细胞内BGP含量,而中药血清联合BMP-2后,ALP活性及BGP含量明显提高,尤其以5％低浓度联合组为明显.各组成骨诱导第21天以激光共聚焦显微镜扫描细胞内钙离子浓度变化,5％中药血清+BMP-2组、BMP-2组的荧光强度明显强于其他各组,且5％中药血清+BMP-2组荧光强度最为明显.结论 不同浓度补肾中药血清单独诱导人脐血间充质干细胞成骨分化作用较弱,但联合BMP-2后均能不同程度提高人脐血间充质干细胞成骨活性,尤其以5％低浓度补肾中药血清为佳,且具有一定的协同促进作用.