活血化瘀中药对人永生化角质形成细胞株活血的影响及作用机制

摘要

目的 观察中药活血化瘀复方对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导人永生化角质形成细胞株Ha-cat增殖、凋亡的影响.方法 TNF-α诱导Ha-cat在体外模拟银屑病表皮角质细胞的过快增殖为模型组,将20、25、30 g/L浓度的活血化瘀复方水提物分别作用于模型组细胞24 h,以全程仅用DMEM完全培养基为空白对照组.倒置显微镜下观察各组细胞形态学改变,CCK8法和流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡情况;RT-PCR和Western印迹技术分别检测细胞中Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表达情况.结果 活血化瘀复方各剂量组对Ha-cat细胞增殖抑制率均明显高于空白对照组和模型组(P<0.05);其中25 g/L、30 g/L剂量组对Ha-cat细胞增殖抑制程度明显高于20 g/L剂量组(P<0.05).模型组Ha-cat细胞凋亡率明显低于空白对照组(P<0.05);活血化瘀复方各剂量组细胞凋亡率均明显高于空白对照组和模型组(P<0.05);其中30 g/L剂量组对Ha-cat细胞凋亡的促进程度明显高于20 g/L、25 g/L剂量组(P<0.05).模型组Ha-cat细胞Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的相对表达量均明显低于空白对照组(P<0.05);活血化瘀复方组各剂量组Bax mRNA和蛋白的相对表达量均明显高于模型组,且随剂量的增加逐渐提升(P<0.05);活血化瘀复方组各剂量组Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量与模型组相比虽有提升,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 中药活血化瘀复方通过上调Bax基因表达,诱导角质形成细胞凋亡,进而抑制TNF-α诱导的Ha-cat细胞增殖,发挥对银屑病的治疗作用.