人参皂苷Rg1延缓三丁基过氧化氢诱导细胞衰老的作用机制

摘要

目的 研究人参皂苷Rg1对三丁基过氧化氢(tert-butylhydroperoxide,t-BHP)诱导的快速衰老细胞线粒体功能的影响.方法 WI-38细胞从20代开始培养,随机分为年轻组、对照组、单纯t-BHP作用组(即模型组)和5、10、20μmol/L人参皂苷Rg1预处理组.通过透射电镜观察细胞超微结构的变化;流式细胞术分析细胞周期,计算G1期细胞的比率;SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色,计算阳性细胞数;流式细胞术检测各组细胞的线粒体膜电位;化学发光法测量细胞内ATP的水平;分光光度计法比较各组细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ的活性变化.结果 100 μmol/L t-BHP作用4次后的WI 38细胞出现典型的衰老特征,表现为体积增大,胞体变平,次级溶酶体增多,线粒体肿胀,同时G1期细胞比例和SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数明显增加.模型组线粒体膜电位较年轻组和对照组有下降趋势,经人参皂苷Rg1处理后线粒体膜电位有不同程度的提高,但差异无统计学意义;ATP生成量模型组(6434±2207)较年轻组(10484±1056)和对照组(8936±2457)明显下降(均为P＜0.05),不同剂量的人参皂苷Rg1处理后能提高ATP水平(P＜0.05);线粒体呼吸链复合物Ⅳ的活性模型组(0.2653±0.0211)较年轻组(0.3832±0.0938)和对照组(0.5032±0.1218)明显下降(均为P＜0.05),不同剂量的人参皂苷Rg1处理能提高复合物Ⅳ的活性(P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1能有效对抗t-BHP诱导的细胞衰老,有较好的抗衰老作用;人参皂苷Rg1可能通过提高线粒体呼吸链复合物Ⅳ的活性而提高ATP生成量,从而对抗t-BHP诱导的线粒体损害.