外泌体Homer 1a对氧糖剥夺诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制

摘要

目的探究外泌体Homer 1a通过Notch信号通路对氧糖剥夺(OGD)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法选取胰蛋白酶消化传代PC12细胞分为对照组、模型组、空载体组和Homer 1a组(n=9)。对照组正常培养PC12细胞,模型组建立OGD损伤模型,空载体组和Homer 1a组分别将空载体和过表达Homer 1a载体转染到OGD的PC12细胞。采用实时荧光定量PCR检测Homer 1a mRNA表达,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒测定乳酸脱氢酶活性、丙二醛水平、超氧化物歧化酶活性,ELISA检测白细胞介素(IL)6、IL-1β、TNF-α水平,Western blot检测Hormer 1a、Notch1、Notch基因细胞内区(NICD)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组、空载体组和Homer 1a组Homer 1a表达、细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性、丙二醛、IL-6、IL-1β、TNF-α、Notch1、NICD蛋白表达明显升高,细胞活性、超氧化物歧化酶活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,Homer 1a组Homer 1a mRNA和蛋白表达、细胞活性、超氧化物歧化酶活性明显升高[3.96±0.45 vs 2.18±0.19,3.68±0.72 vs 2.36±0.33,(78.01±8.22)%vs(52.82±7.34)%,(30.80±1.95)U/mg vs(13.67±0.20)U/mg,P<0.05]。Homer 1a组细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性、丙二醛、IL-6、IL-1β、TNF-α、Notch1、NICD蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论上调外泌体Homer 1a表达通过抑制Notch信号通路提高OGD诱导的PC12细胞活性,抑制凋亡,同时降低氧化应激和炎症水平。