人胰腺癌细胞株MUC2基因启动子区甲基化状态检测和分析

摘要

背景:近年表观遗传学修饰方式之一的DNA甲基化成为肿瘤研究的热点.目前已发现胰腺癌中存在MUC2表达异常.目的:探讨人胰腺癌细胞株MUC2表达与其基因启动子区甲基化的关系,以了解胰腺癌的发生机制.方法:以人胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、SW1990和PaTu8988s为研究对象,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测去甲基化制剂DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后各胰腺癌细胞株MUC2 mRNA/蛋白表达的变化,以甲基化特异性PCR(MSP)结合测序检测MUC2基因启动子区CpG岛甲基化状态.结果:5-Aza-CdR处理前,胰腺癌细胞株AsPC-1、CFPAC-1和SW1990无MUC2 mRNA/蛋白表达或低表达;经5-Aza-CdR处理后,MUC2 mRNA/蛋白重新表达.MSP结合测序显示上述胰腺癌细胞株MUC2基因启动子区CpG岛存在高甲基化.结论:人胰腺癌细胞株MUC2表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关.MUC2基因启动子区CpG岛高甲基化可能在胰腺癌的发生、发展中起一定作用.