脂质体法转染人肿瘤坏死因子-α基因对裸鼠人肝癌移植瘤的抑制效应及其机制

摘要

背景:外源性肿瘤坏死因子(TNF)-α联合化疗药物对肿瘤的疗效较单独应用更佳,为肿瘤治疗提供了新的方向.目的:对裸鼠人肝癌移植瘤模型行脂质体介导的TNF-α基因瘤内转染,研究肝癌移植瘤的生长抑制情况及其机制.方法:经脂质体介导.以真核表达质粒pSVK3-TNF-α分别转染人肝癌细胞株SMMC-7721和裸鼠皮下SMMC-7721细胞移植瘤.测定SMMC-7721细胞的TNF-α浓度,甲基噻唑基四唑(MTT)法测定细胞杀伤率,流式细胞仪和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞周期和凋亡情况.结果:TNF-α转基因治疗裸鼠人肝癌移植瘤结束第5 d,移植瘤体积为(75.28±35.35)mm3,显著低于对照组的(326.45±103.64)mm3(P＜0.05).TNF-α基因体外转染SMMC-7721细胞24、48、72 h后,基因转染组每106个细胞的TNF-α表达量分别为(1680±187)Pg、(1702±205)Pg和(1650±164)pg,细胞杀伤率分别为(37.1±2.4)%、(79.4±4.3)%和(84.2±4.6)%.基因转染72 h后,SMMC-7721细胞增殖指数为(30.5±3.2)%,显著低于对照组的(46.1±3.9)%(P＜0.05);凋亡指数为(10.0±2.1)%,显著高于对照组的(2.7±0.4)%(P＜0.01).结论:脂质体介导的TNF-α基因转染裸鼠人肝癌移植瘤可明显抑制肿瘤生长,其机制可能为影响肿瘤细胞生长周期以及诱导肿瘤细胞凋亡.