羟基喜树碱富集结肠肿瘤干细胞样群体的初步研究

摘要

肿瘤干细胞是临床上肿瘤耐药的主要机制,识别并靶向肿瘤干细胞为肿瘤治疗的研究带来了新的思路.目的:探讨在体外以化疗药物富集结肠肿瘤干细胞样群体的可行性.方法:应用前期实验中以药物浓度递增诱导法建立的羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT,免疫荧光标记干细胞表面抗原CD133,Hoechst33342/PI双染流式细胞仪检测、分选侧群(SP)细胞.实时PCR检测干细胞相关和多药耐药相关基因表达.结果:亲代细胞株SW1116中CD133阳性群体和SP群体分别仅占2%和1%,耐药细胞株SW1116/HCPT中则高达7%和61%,多药耐约基因MDR1抑制剂维拉帕米可使两组SP群体均下降至接近0水平.SW1116/HCPT细胞SP群体中干细胞相关基因CD133、Nanog和多药耐药相关基因MDR1、MRP1、MRP2、MRP6 mRNA表达水平较非SP群体显著上调(P<0.05).结论:HCPT药物浓度递增诱导法可成功寓集结肠肿瘤干细胞样群体,其SP亚群中存在干细胞相关和多药耐药相关基因高表达.