circPUM1通过调控miR-524-5p表达对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响

摘要

目的 探讨环状RNA PUM1(circPUM1)对结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其分子机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结肠癌组织、癌旁组织中circPUM1、微小RNA-524-5p(miR-524-5p)的表达量.体外培养人结肠癌细胞株SW620,分别将si-NC、si-circPUM1、miR-NC、miR-524-5p mimics、si-circPUM1与anti-miR-NC、si-circPUM1与anti-miR-524-5p转染至SW620细胞.甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证circPUM1是否能够结合miR-524-5p;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)表达量.结果 结肠癌组织circPUM1的表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.05),miR-524-5p的表达水平显著降低(P＜0.05);干扰circPUM1表达或miR-524-5p过表达后,细胞活力显著降低(P＜0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P＜0.05),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.05),p21、Bax蛋白表达显著升高(P＜0.05);双荧光素酶报告实验证实circPUM1可靶向结合miR-524-5p的作用位点;抑制miR-524-5p表达可减弱干扰circPUM1表达对SW620细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的作用.结论 circPUM1可通过海绵吸附miR-524-5p促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡.