D-柠檬烯对精索静脉曲张大鼠生精功能的保护作用

摘要

目的探讨D-柠檬烯对精索静脉曲张（VC）大鼠生精功能的保护作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为4组,假手术组（A组）,假手术+D-柠檬烯组（B组）,VC组（C组）,VC+D柠檬烯组（D组）。C、D组行左肾静脉缩窄术建立VC大鼠模型,B、D组术后每日腹腔注射D-柠檬烯200 mg/kg,A、C组注射等量生理盐水,4周后取左侧睾丸检测。苏木精-伊红（HE）染色,观察睾丸组织形态变化;分光光度法检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量;采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测生精细胞凋亡指数;免疫组织化学和蛋白质印迹法（Western blot）检测B细胞淋巴瘤/白血病相关X蛋白（bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3的表达水平;组间比较采用t检验。结果 A、B组大鼠睾丸未见明显组织学变化,C组可见明显病理损伤,D组较C组损伤明显改善;C组SOD含量（0.23±0.03）显著低于A组（0.79±0.04）（t=22.183,P＆0.05）,D组SOD含量（0.51±0.03）高于C组（t=13.123,P＆0.05）,C组MDA含量（5.59±0.39）显著高于A组（1.30±0.12,t=18.386,P＆0.05）,D组MDA含量（3.89±0.20）低于C组（t=6.734,P＆0.05）;C组凋亡（32.43±3.88）明显高于A组（2.41±0.67,t=17.045,P＆0.05）,D组凋亡细胞（17.12±2.66）低于C组（t=7.273,P＆0.05）;免疫组织化学和Western blot结果显示,C组的bax和Caspase-3蛋白表达量明显高于A组（1.179±0.070、0.469±0.220比0.453±0.043、0.143±0.017,t=15.157、20.431,P值均＆0.05）,bcl-2蛋白表达量低于A组（0.476±0.021比1.148±0.084,t=13.414,P＆0.05）;D组的的bax和Caspase-3蛋白表达量明显少于C组（0.689±0.054、0.282±0.031比1.179±0.070、0.469±0.220,t=9.540、8.442,P值均＆0.05）,bcl-2表达水平明显高于C组（0.794±0.033比0.476±0.021,t=14.222,P＆0.05）。结论 D-柠檬烯可通过抗氧化和抗凋亡作用,对精索静脉曲张大鼠生精功能起保护作用。