钙调蛋白抑制剂N-（6-氨基己基）-5-氯-1-萘磺酰胺通过逆转上皮-间充质转化抑制胶质母细胞瘤细胞的侵袭、迁移

摘要

目的探讨钙调蛋白（CaM）抑制剂N-（6-氨基己基）-5-氯-1-萘磺酰胺（W-7）通过逆转上皮-间充质转化（EMT）抑制胶质母细胞瘤（GBM）细胞侵袭、迁移能力。方法细胞计数试剂盒（CCK-8）检测W-7对U87、U251胶质瘤细胞存活率的影响。Transwell侵袭实验检测对照组和W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数目。划痕愈合实验检测各组U87、U251细胞相对迁移距离。Western blot法检测各组U87、U251细胞中上皮标志物（E-钙黏蛋白）和间质标志物（N-钙黏蛋白、波形蛋白）以及转录因子（ZEB1蛋白）的相对表达水平。倒置显微镜下观察各组U87、U251细胞形态变化。免疫荧光检测各组胶质瘤细胞N-cadherin的表达差异。结果 W-7处理组穿过小室底膜的U87、U251细胞数少于对照组（P=0.001）;W-7处理组U87、U251细胞愈合速率低于对照组,24h后差异均有统计学意义（P=0.001、0.006）。W-7处理组中U87、U251细胞E-钙黏蛋白的相对表达水平高于对照组（P=0. 001）,而N-钙黏蛋白、ZEB1、波形蛋白相对表达水平低于对照组（P=0.001）。与对照组比较,W-7处理组U87、U251细胞形态呈椭圆形、圆形改变,细胞迁移能力减弱。结论 CaM抑制剂W-7能够通过逆转EMT抑制GBM细胞的侵袭、迁移能力。