转染胸苷磷酸化酶基因对肝癌细胞的双重影响

摘要

目的探讨转染胸苷磷酸化酶(TP)cDNA对肝癌细胞SMMC-7721药理及生理作用的影响.方法构建包含TP cDNA全长的真核表达载体,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TP mRNA表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测药物的敏感性,Boyden小室法检测诱导内皮细胞移动的能力,流式细胞仪检测凋亡细胞百分比.结果阳性转染克隆(SMMC-7721-pTP)与转染空载体(SMMC-7721-vec)相比,TP mRNA表达水平由0.48±0.06升高至2.09±0.16(P＜0.01);氟铁龙的IC50则由(162.25±11.03)μmol/L降至(56.81±9.85)μmol/L(P＜0.01);凋亡细胞百分比由(6.36±1.97)%降至(3.76±0.50)%;诱导内皮细胞穿过微孔滤膜的数目则由122±35升高至275±29(P＜0.01).结论转染TP cDNA能够提高SMCC-7721细胞对5-FU前体药物的敏感性,但同时具有抑制细胞凋亡和诱导内皮细胞移动能力增强的不良作用.转染TP cDNA的途径无治疗肝细胞癌的潜在临床价值.