从噬菌体肽库中筛选并鉴定中期因子特异性结合肽

摘要

目的筛选并鉴定可与中期因子（MK）特异性结合的短肽。方法以人重组MK蛋白为靶分子,分别从噬菌体随机7肽和环7肽展示库中筛选出与MK蛋白高特异性结合的阳性噬菌体克隆。酶联免疫吸附试验（ELISA）鉴定所挑选噬菌体和MK蛋白的亲和力。噻唑蓝（MTT）比色法体外评价该合成短肽对HepG2细胞生长的抑制作用。结果经过3轮淘洗,筛选出的20个阳性克隆与MK蛋白均具有一定结合力,测序并推导出优选的3条线性肽和3条环肽的氨基酸序列,合成肽能不同程度抑制HepG2细胞的增殖,其中MK-P3（CTSTAMDNC）抑制HepG2增殖作用最强（P＜0.01）,其对HepG2肝癌细胞的抑制率可达40.7%。结论成功筛选出了4条可和MK蛋白结合并对肿瘤细胞有一定抑制作用的短肽。