质谱分析食管癌组织磷脂酰胆碱快速判定肿瘤边界的应用

摘要

目的 探讨内部萃取电喷雾电离质谱(iEESI-MS)分析技术在快速区分食管癌组织与癌旁正常组织边界中的应用价值,研究磷脂酰胆碱(POPC)等磷脂类物质差异性表达的生物学意义.方法 采用自主设计的取样器和自主开发的iEESI-MS技术,在不进行样本预处理的前提下,对我院26例食管癌患者配对的食管癌组织及癌旁正常组织进行质谱分析;iEESI-MS参数:正离子模式,质谱扫描范围质荷比(m/z)为50～2 000 Da;电离电压为+4.5 kV;离子传输管温度为150℃;离子传输管电压为35 V;透镜电压为100 V;其他质谱参数均由LTQ-MS系统自动优化,获得其iEESIMS指纹谱图;用Matlab软件对样本iEESI-MS指纹谱图数据进行分析,得到主成分分析(PCA)结果;相对丰度数据用SPSS 19.0软件进行分析.结果 本方法能在1min完成精确取样、质谱检测和数据分析;食管癌组织与癌旁正常组织在m/z 567、611、655、699、743、771、783、787、799、882等处的相对丰度差异有统计学意义(P＜0.05),其中食管癌组织中m/z 783、799比较于癌旁正常组织显著增加,多级碰撞诱导解离实验(CID)证实m/z 783为磷脂酰胆碱钠盐(POPC+ Na+),m/z 799为磷脂酰胆碱钾盐(POPC+ K+),食管癌组织中POPC+ Na+及POPC+K+在质谱指纹谱中相对丰度高于癌旁正常组织(m/z 783:7.45±1.65比0.82±0.21,P＜0.05;m/z 799:8.86±1.37比1.23±1.46),差异有统计学意义(P＜0.05);PCA区分两组样本的准确率达96.15％ (25/26).结论 结合组织精密取样器和iEESI-MS技术,可快速得到稳定的食管癌及癌旁正常食管组织质谱信号,基于POPC等磷脂类物质差异表达可区分食管癌组织边界.