程序性死亡因子配体1/程序性死亡因子1免疫调控节点调控放疗耐受非小细胞肺癌对自然杀伤细胞的肿瘤免疫逃逸

摘要

目的观察放疗耐受非小细胞肺癌（NSCLC）逃逸自然杀伤（NK）细胞肿瘤免疫的现象并探讨机制。方法累积放疗A549细胞在0、4、8、12 Gy时实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）测定程序性死亡因子配体1（PD-L1）的相对表达量为1.000±0.078、1.440±0.112、1.760±0.1 52、2.050±0.166;H157为1.000±0.055、1.370±0.094、1.530±0.132、1.890±0.146。直至诱导放疗耐受细胞株后并验证放疗耐受性。人外周血分离NK细胞与肿瘤细胞共培养,检测各组免疫毒力指数。Western blot检测NK细胞分别与两组细胞共培养后程序性死亡因子1（PD-1）表达量。最后,使用PD-L1、PD-1中和抗体分别作用两组细胞观察NK细胞免疫毒力指数变化。结果放疗耐受A549、H157中高表达。A549中PD-L1相对表达量为1.000±0.078,放疗耐受A549中PD-L1相对表达量为4.150±0.292（t=-18.052,P=0.001）。H157中PD-L1相对表达量为1.000±0.055,放疗耐受H157中PD-L1相对表达量为5.070±0.387（t=-18.034,P=0.001）。不同比例下NK细胞对放疗耐受A549、H157的免疫毒力均弱于A549、H157。放疗耐受NSCLC与NK细胞共培养后诱导NK细胞PD-1表达升高。PD-L1、PD-1中和抗体作用放疗耐受A549、H157后可以增强免疫毒力,但对A549、H157无效。结论放疗耐受NSCLC通过自身高表达PD-L1及诱导NK细胞PD-1表达增加逃逸NK细胞的肿瘤免疫。