微小RNA-17-5p在脑恶性胶质瘤患者血清和肿瘤组织的表达及其对U87MG和U251体外作用

摘要

目的观察恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清微小RNA（miRNA,miR）-17-5p的表达,以及miR-17-5p对恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251的体外作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清miR-17-5p的表达水平;将U87MG和U251细胞用化疗药物20μmol/L顺铂（DDP）,50μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理后检测miR-17-5p表达变化;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养,检测miR-17-5p在无血清条件对细胞存活的作用;将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,测定其细胞增殖、细胞迁移、集落形成以及肿瘤蛋白p53可诱导核蛋白1（TP53INP1）、Tripartite基序蛋白8（TRIM8）和含BTB结构域的锌指蛋白（ZBTB4）蛋白表达量的变化。结果通过RT-qPCR检测可见恶性胶质瘤患者肿瘤组织（7.40±1.55）和血清（2.70±0.55）miR-17-5p的表达较癌旁组织和健康人血清明显升高（P=0.019和P=0.028）,同时采用化疗药物20μmol/L DDP、50μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理U87MG和U251细胞后,其miR-17-5p的表达量也明显上升（P=0.001）。将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic,并用无血清培养结果表明,miR-17-5p能够促进U87MG和U251在无血清条件下的细胞存活,同时检测显示miR-17-5P在低浓度（2.5%）血清下可以促进U87MG和U251细胞迁移[（20.50±2.33）mm和（14.50±1.35）mm],促进U87MG和U251集落形成[（225±45）个和（312±58）个],而在高浓度血清（10%）条件下,miR-17-5p并不能促进U87MG和U251细胞迁移,反而会抑制细胞增殖,表明miR-17-5p能够降低抑癌基因TP53INP、TRIM8和ZBTB4蛋白表达。结论恶性胶质瘤患者血清和组织miR-17-5p表达增加,同时miR-17-5P对于恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251在不良环境中的细胞生存具有促进作用。