γ-氨基丁酸B1型受体对紫杉醇诱发神经痛大鼠背根神经节/脊髓背角核因子-κB通路的调控作用

摘要

目的通过鞘内给予不同药物,观察γ-氨基丁酸B（GABAB）受体对紫杉醇诱发神经痛大鼠背根神经节（DRG）/脊髓背角核因子-κB（NF-κB）通路的调控作用。方法清洁级SD雄性大鼠（体重160~180 g）,腹腔注射紫杉醇制备大鼠紫杉醇诱发神经痛模型,取模型制备成功的40只大鼠,采用随机数字表法,根据鞘内给药不同分为4组（n=10）:紫杉醇组（P组）:生理盐水10μl;巴氯芬（Baclofen）组（B组）:Baclofen 0.5μg/10μl;Saclofen（S组）:Saclofen 30μg/10μl;SN50组（SN）组:SN50 200 ng/10μl。另取10只同周龄正常大鼠腹腔注射等体积溶剂并鞘内注射生理盐水10μl作为对照组（C组）。5组大鼠分别于腹腔给药前1 d（T1）、鞘内给药前1 d（T2）、鞘内给药后120 min（T3）测定大鼠50%机械缩足阈值（PWT）,然后快速取腰段DRG和脊髓背角,采用分子生物学方法测定GABAB 1受体、NF-κBp65及炎性因子自细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达变化。结果与T1比较,除C组外其余各组T2时点的PWT均明显降低（P、B、A、SN组P值分别为0.001、0.000、0.000、0.000）;与T2比较,T3时点B、SN组的PWT升高（B/SN组P值分别为0.003、0.002）,而S组PWT降低（P=0.007）。P组脊髓背角GABAB1受体的mRNA（0.59±0.06）和蛋白（0.42±0.05）与C组的mRNA（0.89±0.05）和蛋白（0.66±0.02）比较表达下调（P=0.000、0.000）,而DRG中GABAB1受体的mRNA（1.31±0.12）和蛋白（0.37±0.02）与C组的mRNA（0.95±0.07）和蛋白（0.28±0.04）比较则表达上调（P=0.000、0.003）;与C组比较,P组的NF-κBp65、IL-1β和TNF-α的mRNA及蛋白在脊髓背角和DRG上均表达上调（mRNA:P=0.000、0.001、0.000、0.000、0.000、0.000,蛋白:P=0.004、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000）。与P组比较,B组GABAB1受体mRNA及蛋白表达在脊髓背角（1.01±0.08比0.59±0.06;0.50±0.03比0.42±0.05）与DRG（1.60±0.10比1.31±0.12;0.50±0.03比0.37±0.02）一致上调（mRNA:P=0.000、0.000,蛋白:P=0.004、0.000）,而NF-κBp65、IL-1β及TNF-α的mRNA及蛋白均表达下调（mRNA:P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.001、0.000,蛋白:P=0.000、0.001、0.000、0.000、0.000、0.000）;S组和B组的GABAB1受体及上述细胞因子表达则正好相反;在SN组的脊髓背角和DRG中,随着NF-κBp65、IL-1β及TNF-α的mRNA和蛋白表达下调（mRNA:P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000,蛋白:P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000）,GABAB1受体mRNA（0.36-±-0.03比0.59±0.06;0.34±0.03比1.31±0.12）和蛋白（0.29±0.01比0.42±0.05;0.28±0.03比0.37±0.02）表达也明显下调（mRNA:P=0.000、0.000,蛋白:P=0.000、0.003）。结论激活紫杉醇诱发神经痛大鼠脊髓背角内GABAB受体,或阻断NF-κB通路,均可通过下调DRG和脊髓背角中NF-κB及下游炎性因子表达,缓解神经痛,NF-κB在其中发挥关键作用。