肿瘤坏死因子-α基因抑制耐药性人乳腺癌细胞的研究

摘要

目的 观察肿瘤坏死因子 α（TNF α）基因对耐药细胞生长的抑制作用及机制。方法以重组逆转录病毒为载体将TNF α基因导入耐药性人乳腺癌细胞系MCF7/ADR ,获阳性克隆MCF7/ADR TNF1与MCF7/ADR TNF2。体外观察并比较野生型和转基因癌细胞的生长速度 ,流式细胞仪分析细胞周期的变化 ,端粒酶重复扩增实验 （TRAP）综合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法测定端粒酶活性的变化。结果 MCF7/ADR TNF1与MCF7/ADR TNF2细胞中有TNF α基因的整合和表达 ,病毒上清中TNF α含量分别为 173 7μg/L（10 6个细胞 /4 8h）、2 875 μg/L。与阴性对照细胞相比 ,MCF7/ADR TNF1与MCF7/ADR TNF2细胞的生长速度明显减慢 ,生长抑制率分别为 3 2 .4%、5 4.8% ,细胞周期阻滞于S +G2 /M期 ,端粒酶活性降低。结论 外源性TNF α基因的导入能有效抑制耐药细胞 ,阻滞细胞周期、抑制端粒酶活性可能为其主要机制。