乙型肝炎病毒x蛋白与肝癌生物学特性的研究

摘要

目的 观察乙型肝炎病毒x蛋白（HBx）对肝癌多药耐药基因（MDR）1和MRP1和促血管生长因子（VEGF）之间的作用,探讨HBx影响肝癌生物学特性如多药耐药性和血管生成的分子机制。方法利用瞬时转染HBx基因的方法建立细胞模型,分别使用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测转染前后HepG2细胞的多药耐药相关基因和VEGF的表达情况。使用四甲基偶氮唑蓝（MTT）和流式细胞仪检测阿霉素诱导后两种细胞的存活率和凋亡率,了解HBx转染后细胞耐药性的变化。结果转染前后相比,转染HBx基因的HepG2细胞多药耐药相关基因和VEGF基因表达水平比转染前均明显上升（P＜0.05）,转染后MRP1基因表达量与转染前之比分别为3.11,MDR1为3.70,VEGF为2.83。Western blot显示转染后MDR1蛋白水平上升1.10倍,MRP1蛋白上升1.74倍。MTT结果显示转染后细胞IC50明显高于对照组（P＜0.05）。AnnexinV-FITC／PI检测提示阿霉素诱导后转染组凋亡率明显低于于对照组的（9.8±1.5）％、（17.8±1.7）％。结论乙型肝炎病毒x蛋白可能与肝癌发展过程中的生物学特性如多药耐药和血管生成密切相关。