载药交联脱细胞角膜基质透镜的制备及体外药物缓释效果评价

摘要

目的 评价载左氧氟沙星脱细胞角膜基质透镜的体外药物释放特点,并探讨1-(3-二甲氨基)丙基二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)交联对其载药的影响.方法 收集重庆爱尔眼科医院屈光科在飞秒激光辅助的角膜小切口基质透镜取出术(SMILE)中获取的角膜基质透镜,采用高质量浓度氯化钠(NaCl)联合核酸酶制备脱细胞角膜基质透镜.采用随机数字表法将脱细胞角膜基质透镜随机分为正常组、0.5％左氧氟沙星组、3％左氧氟沙星组和5％左氧氟沙星组,每组4个,正常组未进行任何处理,载药各组将脱细胞角膜基质透镜分别浸泡于质量分数0.5％、3％、5％左氧氟沙星溶液中3h进行载药实验.采用EDC与NHS 5∶1混合液对脱细胞角膜基质透镜进行交联,用随机数字表法将脱细胞角膜基质透镜随机分为非交联组、0.01 mmol EDC组、0. 05 mmol EDC组和0. 25 mmol EDC组,按照分组将脱细胞角膜基质透镜浸入不同浓度EDC/NHS中交联4h,然后浸于3％左氧氟沙星溶液中进行载药实验.采用高效液相色谱法(HPLC)测定各组载药角膜基质透镜缓释的药物质量浓度;以光谱扫描法测定各组角膜基质透镜透光率;采用扫描电子显微镜观察各组脱细胞角膜基质透镜的表面超微结构.结果 载药后1、7、14、21 d,0.5％、3％、5％左氧氟沙星脱细胞角膜基质透镜释放的药物浓度总体比较差异有统计学意义(P＜0. 05) ;0. 01、0. 05和0. 25 mmol EDC组释放的药物浓度均高于非交联组,差异均有统计学意义(均P＜0. 01),其中0.05 mmol EDC组各时间点释放的药物质量浓度最高.所有交联组的药物缓释时间可达21 d,随时间延长各组释放的药物质量浓度呈缓慢下降趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).非交联组和正常组透镜平均透光率分别为(88. 68±1.19)％和(91. 55±1.16)％,差异无统计学意义(P＞0. 05);载药脱细胞角膜基质透镜的平均透光率较正常组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).扫描电子显微镜观察结果显示,交联后透镜的胶原纤维间空隙缩小,纤维排列紧密,以0.25 mmol EDC组最明显.结论 EDC/NHS交联能提高脱细胞角膜基质透镜载药效果,可能与胶原纤维空隙缩小有关.载药交联脱细胞角膜基质透镜具有良好的体外药物缓释效果.