一氧化氮合酶抑制剂对大鼠半乳糖性白内障的防治作用

摘要

背景研究发现，白内障患者的血液、房水、泪液及晶状体内一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）含量均升高。NO是一种极不稳定的生物自由基，其生成依赖于NOS。目前NOS抑制剂对白内障防治作用的研究鲜有报道。目的制作大鼠半乳糖性白内障模型，应用NOS抑制剂-硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）滴眼液进行干预，探讨L．NAME对大鼠半乳糖性白内障的作用。方法清洁级Wistar大鼠60只用随机数字表法随机分为对照组、模型组、L-NAME组3个组，每组各20只。对照组20只大鼠皮下注射质量分数0．9％生理盐水30ml／kg；模型组与L-NAME组各20只大鼠均给予皮下注射等体积质量分数50％D-半乳糖溶液，L-NAME组大鼠同时用L-NAME滴眼液点眼，每日3次。注射后第10、20、30天，在裂隙灯显微镜下检查各组鼠眼情况并对晶状体混浊程度进行评分，于注射后第30天摘出晶状体，检测各组大鼠晶状体中NO及NOS的含量。应用流式细胞分析技术检测各组大鼠晶状体上皮细胞（LECs）中凋亡基因半胱天冬酶-3（caspase-3）的含量。采用重复测量两因素方差分析比较各组大鼠不同时间点晶状体混浊评分的差异，采用单因素分析法比较各组大鼠晶状体中NO、NOS及caspase-3含量，以平均荧光强度指数（MFI）表示蛋白表达量。结果模型组和L-NAME组大鼠皮下注射50％D-半乳糖溶液后晶状体出现混浊，模型组大鼠晶状体混浊评分均明显高于L-NAME组；模型组和L-NAME组大鼠的晶状体混浊评分随着实验时间的延长均增加，差异均有统计学意义（F时间=435．251，P=0．000；F分组=395．120，P=0．000）。对照组大鼠晶状体中NO含量为（0．45±0．15）μmol／g，模型组为（2．67±0．47）μmol／g；L-NAME组为（1．68±0．34）μmol／g，3个组间差异有统计学意义（F=58．872，P=0．000）。对照组大鼠晶状体中NOS含量为（0．0160±0．0020）U／m1（商品单位），模型组为（0．0370±0．0040）U／ml（商品单位），L-NAME组为（0．0270±0．0010）U／ml，3个组间的差异有统计学意义（F=66．174，P：0．000）。对照组、模型组和L-NAME组大鼠晶状体中caspase-3含量分别为339．4±37．9、697．7±46．5和650．7±53．1，各组问差异有统计学意义（F=100．005，P=0．000）。结论大鼠晶状体中NO、NOS和easpase-3含量的多少与晶状体混浊程度有关，L-NAME的局部应用可以抑制半乳糖性白内障晶状体中NOS的表达，减少NO的生成，抑制LECs的凋亡。