C57BL／6．NOD-Aecl Aec2干燥综合征模型小鼠干眼特点的评价

摘要

背景C57BL／6．NOD-Aecl Aee2小鼠是研究人干燥综合征发病机制较理想的动物模型，但其干眼体征、眼表组织的病理学特点尚不清楚。目的观察C57BL／6．NOD-Aeel Aee2干燥综合征模型小鼠眼表组织的病理学变化，明确其是否能够自发地产生干眼。方法实验分为模型组（45只C57BL／6．NOD-Aeel Aee2干燥综合征模型小鼠）和对照组（45只C57BL／6J小鼠）。在两组小鼠第4、8、12、16、20周龄时依次进行空腹血糖检测、泪液分泌试验（sIt）、角膜和结膜丽丝胺绿染色及评分；5个时间点每组各取5只小鼠处死、取材，进行中央角膜上皮厚度测量、结膜杯状细胞计数，泪腺淋巴细胞浸润评估及角膜上皮细胞表面微绒毛观察。结果第4周龄时，两种小鼠均未见明显干眼体征。随着周龄的增加，C57BL／6．NOD-Aecl Aec2小鼠泪液分泌逐渐减少，第8、12、16、20周龄酚红棉线长度依次为（2．7±O．9）、（2．5±0．8）、（1．8±0．6）、（1．9±0．1）mm，均明显短于同龄的C57BL／6J小鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01）；C57BL／6．NOD-Aecl Aee2小鼠角膜结膜丽丝胺绿染色评分值随周龄增加明显升高，12、16和20周龄时其角膜结膜丽丝胺绿染色评分值均明显高于同龄C57BL／6J小鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01）。C57BL／6．NOD-Aecl Aee2小鼠角膜上皮厚度值随周龄的增加逐渐降低，8、12、16、20周龄小鼠中央角膜上皮厚度值均明显低于同龄C57BL／6J小鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01）。C57BL／6．NOD-AeelAee2小鼠结膜杯状细胞数随周龄的增加逐渐减少，8、12、16、20周龄时分别为（8．2±2．4）、（6．2±2．1）、（6．1±2．2）、（4．1±2．0）个，均明显少于同龄C57BL／6J小鼠，差异均有统计学意义（P〈0．01）。泪腺淋巴细胞浸润及腺体破坏加重；扫描电子显微镜观察显示，角膜上皮细胞脱落增多，微绒毛减少，细胞紧密连接减少或中断；至第16周龄时，中央角膜上皮细胞完全脱落，可见内层排列规则的基质层胶原纤维。两种小鼠在第4、8、12、16、20周龄时的空腹血糖值均〈6．0mmol／L，相同周龄时2个组间比较差异均无统计学意义（P=0．637、0．610、0．163、0．086、0．938），而C57BL／6J小鼠的泪液分泌值、中央角膜上皮厚度值、结膜杯状细胞数目及角膜上皮细胞表面的微绒毛密度等干眼指标均未随着小鼠周龄的增加而有所减少。结论C57BL／6．NOD-Aeel Aee2干燥综合征模型小鼠可自发地产生干眼，且随着周龄的增加，其干眼体征加重。该模型小鼠可以较好地模拟人的干眼进程，可作为研究干眼发病机制的理想动物模型。