微小RNA-184转染对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞生物学行为的影响

摘要

背景研究表明，微小RNA-184（miR-184）可能抑制血管内皮细胞的生物学功能，在眼科研究领域，研究miR-184对新生血管的抑制作用对角膜炎性病变、视网膜和脉络膜新生血管性病变的预防和治疗具有一定的意义。目的验证miR．184对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）生物学功能的影响，探讨其对体外新生血管形成的作用和机制。方法体外培养HUVECs株，将对数生长期的细胞分为4个组。空白对照组细胞培养基中不添加脂质体和RNA分子；空白转染组仅添加脂质体，但无RNA分子；阴性对照组添加hsa-miR-184和脂质体；miR-184转染组添加hsa-miR-184miRNAmimic和脂质体。采用MTT法检测各组HUVECs的增生值；采用Transwell小室法观察各组HUVECs的迁移数；构建HUVECs的体外三维培养体系，用Matrigel胶体外管腔形成实验观察各组HUVECs的体外形成管腔的数目。结果Cy3标记siR-Ribo。”脂质体转染后阳性HUVECs呈红色荧光，转染剂浓度〉100nmol／L时荧光最强，阳性细胞数最多，为最优转染浓度。MiR-184转染组和阴性对照组HUVECs中miR-84的相对表达量分别为1524．10±385．89和1．00±0．05，差异有统计学意义（t=-7．894，P〈0．01）。MiR-184转染组转染后48h细胞吸光度（A。。。）值为0．50-t-O．04，转染后24h迁移过膜的细胞数为（55．40-＋5．86）个／视野，分别少于阴性对照组的0．62±0．04和83．40±5．59个／视野，差异均有统计学意义（t=5．639、7．730，均P〈0．01）。MiR-184转染组形成管腔样结构分支点数为（13．33±2．08）个／视野，明显少于阴性对照组的（22．00±2．00）个／视野，差异有统计学意义（t=5．511，JP〈0．05）。结论MiR-184转染后能抑制体外培养的HUVECs的生长和迁移能力，减弱HUVECs基质胶上体外管腔的形成能力，可能参与或调控血管的新生。