叶酸对DNMT1和MeCP2在宫颈癌细胞中表达调节的实验研究

摘要

目的探讨宫颈癌细胞中叶酸对DNA甲基转移酶1（DNMT1）和甲基化CpG岛结合蛋白2（MeCP2）表达的调节作用。方法采用体外实验研究方法,对宫颈癌细胞Caski（HPV16阳性）和C33A（HPV阴性）进行不同浓度（10、50、100、500、750、1000μg/ml）叶酸干预,分别采用Western blot和real-time PCR方法检测两种细胞中DNMT1和MeCP2蛋白的表达量和mRNA水平。结果随着叶酸水平的升高,两种细胞的生长抑制率（C33A:r=0.984,P＜0.001;Caski:r=0.978,P=0.002）和凋亡率（C33A:r=0.989,P＜0.001;Caski:r=0.994,P＜0.001）均逐渐上升,DNMT1蛋白表达（C33A:r=-0.914,P＜0.001;Caski:r=-0.859,P=0.003）及MeCP2蛋白表达（C33A:r=-0.830,P=0.005;Caski:r=-0.981,P＜0.001）均呈逐渐降低趋势,而DNMT1和MeCP2 mRNA的Ct比值在两种细胞中的变化均无统计学意义（P＞0.05）。相同叶酸浓度下,DNMT1蛋白和mRNA表达水平在Caski细胞均较C33A细胞为高,而MeCP2蛋白和mRNA表达水平则在C33A细胞较Caski细胞普遍为高。结论补充叶酸可有效抑制宫颈癌细胞的增殖,促进凋亡,逆转DNMT1和MeCP2蛋白的异常表达;HPV16感染与DNMT1功能异常对宫颈癌的发生可能有协同效应。