不同剂量氟对大鼠骨组织Ihh、Shh、Smo mRNA和蛋白表达的影响

摘要

目的 探讨刺猬蛋白(Hedgehog,Hh)信号通路相关因子(Ihh、Shh、Smo)在慢性氟中毒大鼠骨组织中的表达变化及意义.方法 36只健康SD大鼠,根据体质量(100～120 g)采用随机数字表法分为3组(12只/组,雌雄各半);对照组大鼠饮用自来水(含氟量＜1 mg/L),低氟组和高氟组染氟剂量分别为5、50 mg/L.各组大鼠饲养6个月时,收集24h尿样,取大鼠股骨干骺端,氟离子选择电极法检测尿氟、骨氟含量;HE染色,光镜观察骨组织形态学改变;酶联免疫吸附法检测m清骨碱性磷酸酶(BALP)水平;实时荧光定量PCR (Real-timePCR)和免疫组织化学法检测骨组织Ihh、Shh、Smo mRNA和蛋白表达水平.结果 随着染氟含量的增加,各组大鼠尿氟、骨氟含量和血清BALP水平[尿氟:(1.37±0.44)、(5.96±0.56)、(7.60±0.61)mg/L,骨氟:(306.04±1258)、(652.91±51.83)、(1 094.11±126.34)mg/kg,血清BALP: (27.78±4.09)、(46.59±5.75)、(57.45±3.99)U/L]逐渐增加(P均＜ 0.05).光镜下染氟组大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现.高氟组大鼠Ihh、Shh、Smo mRNA表达水平(1.39±0.36、0.56±0.23、0.40±0.15)高于对照组和低氟组(0.73±0.19、0.92±0.34,0.19±0.04、0.36±0.16,0.14±0.04、0.24±0.13,P均＜0.05),低氟组Shh mRNA表达水平高于对照组(P＜0.05).高氟组大鼠Ihh、Smo蛋白表达水平(138.89±3.72、149.29±7.63)高于对照组和低氟组(127.39±2.69、134.81±3.53,129.64±12.62、139.07±9.30),且低氟组高于对照组(P均＜0.05);高氟组大鼠Shh蛋白表达水平(141.26±7.49)高于对照组(130.96±11.10,P＜ 0.05).结论 Hh信号通路相关因子在氟中毒大鼠骨组织中出现表达改变,氟可能通过诱导Hh信号活化来影响骨形成.