胱天蛋白酶募集域蛋白9与小鼠缺血性脑损伤炎症反应的相关性研究

摘要

目的 研究缺血性脑损伤小鼠脑组织中胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)与炎症反应的关系.方法 取24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成4组,即假手术组、缺血3h组、缺血6h组、缺血12h组,每组6只.缺血组小鼠采用线栓栓塞法构建永久性大脑中动脉阻塞(permanant middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型,各组于术后预定时间点处死小鼠.通过Western blot检测患侧脑组织中CARD9水平和NF-κ B的活化,RT-PCR和ELISA分别检测患侧脑组织中炎症因子TNF-a、IL-1β、IL-6 mRNA及蛋白表达量.采用SPSS 21.0软件进行统计分析,每两组间计量资料比较采用独立样本t检验,采用Pearson相关分析比较CARD9与炎症因子之间的相关性.结果 与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织 CARD9表达均增加[(0.325±0.011)vs(0.462±0.019),P=0.036;(0.735±0.036),P=0.003;(0.903±0.024),P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组缺血脑组织NF-κB的活化均升高[(0.227±0.016)vs(0.316±0.017),P=0.041;(0.445±0.021),P=0.016;(0.671±0.039),P=0.008].与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织TNF-a表达均增加[(0.53±0.06)vs(1.06±0.10),P=0.009;(1.47±0.15),P=0.004;(2.78±0.18),P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h 和 12 h 组脑组织 IL-1β 表达均增加[(0.55±0.07)vs(1.01±0.11),P=0.009;(2.13±0.16),P=0.003;(3.09±0.18),P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-6表达均增加[(1.99±0.18)vs(4.10±0.41),P=0.006;(8.54±0.84),P=0.002;(11.56±0.96),P=0.001].Pearson 相关分析显示 CARD9与 NF-κ B活性、TNF-a、IL-1β、IL-6均存在正相关(r=0.894,P=0.001;r=0747,P=0.008;r=0.810,P=0.001,r=0.773,P=0.007).结论 小鼠缺血性脑损伤早期脑组织中CARD9与炎症反应存在正相关.