脂多糖诱导大鼠急性肺损伤时核因子-κB信号转导及盐酸氨溴索的作用

摘要

目的探讨脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）时核因子κB（NF-κB）的信号转导,以及盐酸氨溴索（AMB）对其的作用。方法雄性SD大鼠108只,实验分为两部分:第一部分选择其中90只,采用随机排列表法分为6组（n=15）:A组无菌生理盐水（NS）0.5ml腹腔注射1h后,再腹腔注射NS0.5ml;B组腹腔注射AMB10mg/kg1h后腹腔注射NS0.5ml;C组腹腔注射NS0.5ml1h后腹腔注射LPS5mg/kg;D、E、F组分别腹腔注射AMB5、10、20mg/kg后1h腹腔注射LPS5mg/kg。各组分别按1、2、4h再分为3个亚组,每组5只。采用酶联吸附免疫法（ELISA）测定肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）水平,并测定BALF中乳酸脱氢酶（LDH）与总蛋白量的变化。采用蛋白印迹法（Western blot）测定肺组织细胞胞核中NF-κBp65、胞浆中NF-κB抑制蛋白-α（IκBα）及c-Jun氨基末端激酶（JNK）的表达。第二部分选择18只大鼠按上述分组法随机分为6组（n=3）,A、B、C、D、E、F组,给药方法同第一部分,腹腔注射NS（A组、B组）或腹腔注射LPS（C、D、E、F组）后4h观察大鼠肺组织病理形态学变化。结果第一部分:与A组比较,C、D、E、F组BALF中LDH、总蛋白量、TNF-α、IL-1β和MIP-2均明显升高（P＜0.05或P＜0.01）;与C组比较,E、F组上述指标均降低（P＜0.05或P＜0.01）。与A组比较,C、D、E、F组肺组织细胞中的NF-κB p65与JNK表达明显增多（P＜0.01）,而IκBα的表达量减少（P＜0.01）;与C组比较,E、F组NF-κBp65与磷酸化JNK的表达减少（P＜0.05或P＜0.01）,而IκBα的表达量增多（P＜0.05或P＜0.01）。第二部分:A、B组肺组织形态学正常,C组呈明显的肺损伤病理形态学改变,D组肺损伤程度与C组相似,E、F组肺损伤程度较C组减轻。结论AMB可以减轻LPS诱导大鼠ALI,其机制可能与抑制肺组织细胞NF-κB p65与JNK的活化,并促进IκBα的表达,以及下调TNF-α、IL-1β和MIP-2的表达有关,且呈剂量依赖性。